1 材料
倒置光學顯微鏡: 日本 Olympus; 402AI 超聲霧化器: 江蘇魚躍醫療設備有限公司; RM2145 切片 機: 德 國 Leica; HI1210 展 片 機: 德 國 Leica; Leica HI1220 烤片機: 德國 Leica; 醫學圖象分析軟 件 IMS 細胞圖象分析系統: 上海申騰信息技術有限 公司; KUBOTA5200 離心機: 日本久保田株式會社; 電熱恒溫鼓風干燥箱: 上海精宏實驗設備有限公司。大鼠適應性喂養 1 周,按體質 量由小到大編號,采用完全隨機法分為正常組、模 型組、地塞米松組、宣肺平喘方高劑量組( XFPC 高 劑量組) 、宣肺平喘方中劑量組( XFPC 中劑量組) 、 宣肺平喘方低劑量組 ( XFPC 低劑量組) ,每 組 各 10 只。
2 實驗方法
末次給藥后 24 h 后,各組大鼠均 以 25% 烏拉坦( 0. 4 mg /100 g) 腹腔注射麻醉后剖 胸,先分離頸前組織,結扎右支氣管,暴露氣管并于 其上剪開小口,插入靜脈留置針至一定深度,結扎 固定后緩緩拔出套管針,以 3 mL 生理鹽水分 3 次行 全肺灌洗,反復沖洗 2 遍,共 3 次 6 遍,回收支氣管 肺泡灌洗液( BALF) ,余置于 15 mL 離心管內離心 3 500 r/min、4 ℃條件下低溫離心 20 min,取細胞沉 淀涂片、瑞氏染色后在油鏡下作白細胞分類計數, 余置 - 20 ℃ 低溫冰箱保存待測。取右肺上葉組織 置于 4% 的多聚甲醛中固定,備病理組織學檢測。 取大鼠腹主動脈血,涂片,余置于 15 mL 離心管內, 3 500 r/pm、4 ℃條件下低溫離心 20 min,移取上清 血漿入 1. 5 mL 離心管,置 - 20 ℃ 低溫冰箱保存 待測。模型組大鼠經卵白 蛋白霧化激發后,出現呼吸急促,張口喘息,腹部翕 動,煩躁不安,易激惹等現象,且皮毛干枯、稀疏,飲 水增多,活動與飲食減少,精神不振,動作遲緩,身 體消瘦。
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