香蕉肉質(zhì)軟糯、香甜可口,含多種維生素和膳食纖 維,終年可收獲,深受廣大消費者的喜愛。香蕉盛產(chǎn)自 熱帶地區(qū),屬于熱敏性水果,怕低溫、忌寒霜,在北方的 冬天,香蕉在運輸及貯藏過程中極易受到冷害的影響, 極易腐爛變質(zhì)而造成經(jīng)濟損失。它的臨界溫度即最適 貯藏溫度為 12~14℃,溫度低于 11℃經(jīng)過一定時間就 會產(chǎn)生不同程度的低溫冷害,冷害的癥狀表現(xiàn)為果皮 外部顏色變暗內(nèi)部出現(xiàn)褐色條紋,不能正常后熟。組 織還會出現(xiàn)水漬狀,導(dǎo)致生理代謝失調(diào),衰老進程加 快,抵抗力減弱。
1 材料與方法
1.1 材料及儀器設(shè)備
1.1.1 材料
新鮮香蕉購于超市。
1.1.2 主要儀器
KM- 1 手持硬度計:日本;SHZ- D(III) 型循環(huán)水式真空泵:鞏義市予華儀器有限責任公司; TGL- 16 臺式高速冷凍離心機:長沙湘儀離心機儀器有限公司;UV- 6100 雙光束紫外可見分光光度計:上海 美普達儀器有限公司;UV- 1600 型紫外可見分光光度 計:上海美普達儀器有限公司;AD200L- P 實驗室分散 勻質(zhì)機:上海昂尼儀器儀表有限公司;99AL240 型電子 分析天平:Mettler- Toledoinstr.Ltd;精宏DK-S26 型電熱恒溫水浴鍋:上海精宏實驗設(shè)備有限公司。
1.2 處理方法
在超市購買色澤一致、大小均勻、無病蟲害和機械 損傷的新鮮香蕉果實,用薄膜包裝后進行如下 4 個處 理,處理Ⅰ(間歇升溫):5℃低溫儲藏 2d,升溫至 14℃ 保持 3d,然后降溫至 5℃,如此反復(fù);處理Ⅱ(間歇升 溫):5℃低溫貯藏 2d,升溫至 14℃保持 2d,然后降溫 至 5℃,如此反復(fù);處理Ⅲ(間歇升溫):5℃低溫貯藏 2d,升溫至 14℃保持 1d,然后降溫至 5℃,如此反復(fù); 對照:5℃恒低溫儲藏。每個處理取 3 個果實進行測試 分析,并 2d 取 1 次樣進行生理生化指標的測定。每個 處理按相同條件單獨貯藏一定數(shù)量的果實,作為貯藏 期間冷害現(xiàn)象的觀察。
1.3 試驗方法
1.3.1 果實硬度的測定
隨機選取幾個果實,在每個果 實的不同部位用裝有 5mm 探頭的果實硬度計測定果 肉的硬度,取其平均值。
1.3.2 多酚含量的測定
參照 Pirie 法并修改:5g 果肉 組織與預(yù)冷的 25mL 1%HCL- 甲醇溶液充分研磨提 取,然后于 4℃下 12000×g 離心 10min,上清液直接用 于比色。樣品重復(fù)測定 3 次。酚類含量以 OD280/gFW 表示。
1.3.3 多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)活性及 丙二醛(MDA)含量的測定
①提取液的制備:取 10g 去皮果肉,加 1g PVP 于 20mL 0.2mol/L 磷酸緩沖液 (pH=6.4)中,冰浴研磨,4℃冰凍離心機 12000×g 離心 30min,取 上 清 液 測 定 PPO、POD 酶活性和丙二醛 (MDA)含量。②PPO 活性的測定:PPO 活性測定參照 Galeazzi 等的方法,并加以改進。③POD 活性的測定: POD 活性的測定按照 Putter 的方法,稍作修改。④ MDA 含量的測定:MDA 含量的測定參照 Heath 和 Pacontrolert的方法。
1.3.4 纖維素含量的測定
纖維素含量參照《植物生理 生化實驗技術(shù)與原理》的方法進行。
1.3.5 纖維素酶(Cellulase)活性的測定
參照胡西琴的 方法。按照 PPO 酶的方法提取粗酶液。將 0.1% 2.0mL 羧甲基纖維素鈉置入 50℃水浴中預(yù)熱 2~3min,加酶液0.1mL 保溫 30min,取出加入 3,5- 二硝基水楊酸(DNS) 1.5mL,沸水浴煮沸 5min,冷卻后用分光光度計在 540nm 處比色測定吸光光度值。纖維素酶活力以 (U/gFW)表示。
2 結(jié)果與分析
2.1 間歇升溫對香蕉果實硬度的影響
如圖 1 所示,在香蕉貯藏期間,香蕉果實的硬度變 化總體上呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。而且對照果比間歇升 溫處理組冷害癥狀明顯,硬度下降較快。經(jīng)間歇升溫處 理后的果實硬度一直在對照組之上,說明間歇升溫能 夠減緩果實硬度降低,可以有效預(yù)防果實冷害。而且在 試驗中可以發(fā)現(xiàn),處理Ⅱ的果實硬度在 6d 之后始終高 于其他組,結(jié)果表明,間歇升溫有助于保持果實硬度, 處理Ⅱ抑制香蕉果實硬度的效果最佳。
2.2 間歇升溫對香蕉纖維素含量的影響
香蕉中含有豐富的纖維素,低溫造成的香蕉果實 冷害,使纖維素流失較快,隨著呼吸作用的消耗,用于 合成營養(yǎng)物質(zhì)的底物減少,也會導(dǎo)致纖維素含量逐漸 減少。如圖 2 所示,貯藏期間間歇升溫處理的果實的纖 維素含量均呈現(xiàn)先降后升的趨勢,經(jīng)間歇升溫的果實 纖維素含量在 10~12d 間突然上升,而對照組則呈現(xiàn)一 直下降的趨勢,且隨著時間的延長,纖維素含量下降越 來越快。結(jié)果表明,間歇升溫對貯藏期間香蕉的纖維素 含量的流失有一定的抑制作用。
2.3 間歇升溫對香蕉纖維素酶活性的影響
香蕉中的纖維素合成受纖維素酶的影響,香蕉冷 害會使酶活性降低,如圖 3 所示,0~8d 期間,4 組處理 的香蕉纖維素酶活性明顯上升,間歇升溫的纖維素酶 活性一直高于對照組酶活性;從 8d 開始,纖維素酶活 性開始下降,而經(jīng)間歇升溫處理的香蕉纖維素酶活性 從 10d 才開始下降,甚至還在上升(處理Ⅰ),這說明間 歇升溫能延緩纖維素酶活性的降低,對保持果實纖維 素酶活性有一定的促進作用。
3 討論與結(jié)論
在本試驗中,香蕉表現(xiàn)出的冷害癥狀有:外果皮變 暗變黑,果肉變軟,到后期果實內(nèi)部出水漬,不可食用; 但經(jīng)過間歇升溫處理的果實,有部分雖果皮已變黑,香 蕉的頭部和根部也變軟,但其果肉大部分保存較好。通 過試驗得知,間歇升溫處理對香蕉冷害有較好的抑制 作用,可以有效地保持香蕉果實的硬度,減少纖維素含 量和酚類物質(zhì)的消耗,延緩纖維素酶、PPO 及 POD 的 活性,減少 MDA 含量,從而達到預(yù)防香蕉冷害的效 果,延緩其衰老。特別是間歇升溫至 14℃保持 2d 此種 方式對預(yù)防香蕉冷害效果更為明顯,有利于維持營養(yǎng) 價值和貯藏品質(zhì),延長貨架期。
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