枸杞,茄科類植物,又名茍起子、甜菜子、枸蹄子 等,是一種藥食同源的食物。枸杞中含有多種生理活性 成分,如枸杞多糖,具有增強免疫、抗腫瘤、抗衰老、 抗疲勞、抗輻射損傷、調節血脂、降血壓、降血糖等功 效,此外,枸杞中的胡蘿卜素還可以美容養顏、滋潤肌 膚,適量食用有助于健康。目前,中國市場上80%的 枸杞仍以干果銷售,深加工高附加值的產品較少,隨著 大健康產業的興起,枸杞作為藥食同源食物開發前景廣闊。研究表明,乳酸菌生長代謝會產生乳酸、胞外多 糖、抗菌肽等物質,這些不僅有利于改善食品風味,還 能提高營養價值,延長保質期。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
枸杞購于寧夏銀川;植物乳桿菌NCU137由南昌大學 食品科學與技術國家重點實驗室保藏。 脫脂乳 雙城雀巢有限公司;明膠 北京鑫達食 品添加劑有限公司;麥芽糊精 國藥集團化學試劑有限 公司;海藻糖 上海阿拉丁生化科技股份有限公司; 蔗糖 安徽省來發食品貿易有限公司;異乳糖、菊粉、 低聚異麥芽糖、麥芽糖醇、乳糖 河南圣斯德實業有限 公司;所有材料與試劑均為食品級。
1.2 儀器與設備
上海精宏SHP-250生化培養箱,上海精宏試驗設備有限公司;YXQ-LS50S IIA/B3生物安全柜 蘇州安泰空氣技術有限公司;YXQ-LS-50S II立式壓力蒸汽 滅菌器 上海博訊實業有限公司醫療設備廠;萬分之 一精密電子天平 梅特勒-托利多儀器(上海)有限 公司;SJ201A-250型榨汁機 浙江蘇泊爾股份有限 公司;凍干顯微鏡 德國bt1有限公司;功率補償 型差示掃描量熱儀 梅特勒-托利多國際股份有限 公司;超低溫冰箱 海爾集團有限公司;真空冷凍干 燥機 上海東富龍科技有限公司;西林瓶 滄州榮昌 玻璃制品有限公司。
1.3 方法
1.3.1 凍干工藝流程
篩選優良的干枸杞→干枸杞復水→打漿→滅菌→冷 卻→接種→發酵→加入保護劑→預凍→凍干
1.3.2 發酵枸杞漿的制備
選取質量、形態好的干枸杞,以1∶3的比例進行復 水,打漿,102 ℃滅菌20 min,冷卻后菌劑接種量為萬分 之一,培養發酵16 h,發酵完的枸杞漿在2 h之內備用。
1.3.3 共晶點、共融點與玻璃態轉化溫度的測定
使用差示掃描量熱儀測定物料的共晶點、共融點 以及玻璃態轉化溫度;用電子天平稱取10 mg左右 調配好的枸杞漿放置于差示掃描量熱儀的鋁盤中,壓 蓋放入儀器中進行測定。儀器的程序設定:一階段以 -10 ℃/min的速率從25 ℃到-50 ℃,保持2 min;二階 段退火過程,以10 ℃/min的速率從-50 ℃到退火溫度 -5 ℃,保持2 min;三階段再以-5 ℃/min從-5.0 ℃ 到-50 ℃,保持2 min;四階段以5 ℃/min的速率從 -50 ℃進行連續掃描直至達到25 ℃。
1.3.4 崩解溫度的測定
取2 μL凍干前發酵枸杞漿放置在凍干顯微鏡的載 物臺,以20 ℃/min的速率使物料的溫度降到-60 ℃, 維持150 s,待物料完全凍實后抽真空,真空度保持在 10 Pa左右,以2 ℃/min的速率升至20 ℃,顯微鏡每5 s 拍攝物料的照片,用于監控并記錄凍干過程,確定物料 的崩解溫度。
1.3.5 凍干曲線的繪制
在凍干過程中每隔10 min記錄樣品溫度,通過記錄 的樣品溫度繪制凍干曲線,每個樣品重復實驗3 次。
1.3.6 凍干樣品的制備
配制不同濃度的保護劑,102 ℃滅菌20 min,冷卻 至室溫,將發酵枸杞漿重懸于不同的保護劑中,混合均 勻,-80 ℃保存備用。
1.3.7 保護劑的選擇與優化
分別選取5%、10%、15%的脫脂乳、低聚異麥芽 糖、菊粉、乳糖、海藻糖、異乳糖,10%、15%、20%的 麥芽糊精,0.5%、1.0%、1.5%的明膠,1%、2%、3%的 蔗糖,5%、10%、15%的麥芽糖醇,10 種不同梯度的保 護劑,分別加入到發酵枸杞漿中進行單因素試驗,確 定適宜保護劑及用量。以存活率為指標,通過正交試驗 進行復配,確定最佳冷凍干燥的復配保護劑。
2 結果與分析
由于發酵枸杞漿屬于多元溶液,成分較為復雜, 多種溶質之間相互作用,結晶情況復雜,降溫處理,水分的部分凍結成晶體的冰,其他成分結晶部分形成 玻璃體。由圖1可以看出,當溫度逐漸從25 ℃降到 -50 ℃的過程中,4~6 min之間,即-22.70~-27.34 ℃ 之間有一個放熱峰,這是因為發酵枸杞漿在由液態變為 固態的過程中需要放出大量的相變潛熱,峰為結晶峰, 即確定發酵枸杞漿部分溶質的結晶點為-19.59 ℃。同 理,當溫度從-50 ℃升到25 ℃時,在34 min與38 min 之間有一個比較矮的吸收峰,因為發酵枸杞漿在從固態 到液態的過程中會吸收相變的潛熱,起始點即共熔點為 -5.28 ℃。因為發酵枸杞漿是復雜的混合物,并不能完 全結晶,結晶點不能準確地反映樣品的凍結狀態,對于 含有的非晶態高分子成分沒有結晶點,玻璃態轉化溫度 是非晶態物質的一個重要物理性質,當處于玻璃態時, 分子鏈和鏈段都不能運動,達到穩固的狀態。實驗結果 顯示,經過10 ℃/min的速率從-50 ℃到-5 ℃的退火過 程,在升溫速率為5 ℃/min時發酵枸杞漿的玻璃態轉化溫 度為-31.82 ℃,所以預凍終點溫度低于-31.82 ℃。
3 結 論
凍干食品不僅保證了食品的品質和營養,相比于 一些罐裝、冷凍食品,更容易運輸且能長時間保鮮。 本研究以復水枸杞漿為原料,經植物乳桿菌發酵16 h 后,測定了發酵枸杞漿的物性參數,并以菌體存活率 為指標來進行保護劑的選擇與優化,最終完成凍干曲 線的繪制。結果表明,發酵枸杞漿的物性參數:結晶 點為-19.59 ℃,共熔點為-5.28 ℃,玻璃轉化溫度為 -31.82 ℃,崩解溫度約為-36 ℃,根據物料的物性參 數,確定了預凍溫度為-40 ℃,繪制預凍曲線并確定 預凍時間為4 h,升華干燥階段的溫度設置為-45 ℃, 完成發酵枸杞漿的凍干曲線繪制;復配保護劑為20%麥 芽糊精、14%乳糖、6%海藻糖的保護效果最佳;加入 復配保護劑后,樣品的崩解溫度約為-21 ℃,確定升 華干燥溫度-30 ℃并繪制樣品的凍干曲線,得到了富 含活菌的枸杞粉。益生菌發酵枸杞粉凍干后活菌數高達 9.6(lg(CFU/g)),含水量低于3%,色澤完好,復 水性強,產品質量佳。凍干發酵枸杞粉既保持了特有的 保健功能,又含有大量的活菌可以調節胃腸菌群生態平 衡,迎合了消費者對高品質食品的需求,符合大健康產 業發展趨勢,因此市場前景非常的廣闊,必將受到越來 越多消費者的青睞。
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