對L-His的質量濃度效應、乳清蛋白構象及所成 凝膠中化學作用力的影響作系統(tǒng)研究。TA-XT plus質構儀 英國Stable Micro Systems公司; BT-90納米激光粒度分布儀 丹東百特儀器有限公司; Nanoplus 2 Zeta電位儀 麥克默瑞提克(上海)儀器有 限公司;NanoDrop2000C超微量分光光度計 賽默飛世 爾科技(中國)有限公司;SpectraMax? i3x多功能酶標儀 美谷分子儀器(上海)有限公司;FE28 pH計 梅特勒托利多儀器(上海)有限公司;DK-S26電熱恒溫水浴鍋 上海精宏實驗設備有限公司;UVmini-1240紫外-可見分 光光度計 島津企業(yè)管理(中國)有限公司。稱取一定質量乳清蛋白加入去離子水中充分攪拌直 至全部溶解,使得蛋白質量濃度為120 mg/mL;加入最終 質量濃度分別為0、1、3、5 mg/mL L-His后充分攪拌, 將每個質量濃度分成5 部分,使用1 mol/L HCl或NaOH 溶液,再將各組蛋白溶液pH值分別調節(jié)至2.00、5.20、 7.59、9.74和10.76。放置4 ℃?zhèn)溆谩?/p>
從分子聚集、靜電行為的角度來看, L-His與乳清蛋白間的相互作用改變了蛋白聚集行為及其 帶電性,進而造成對蛋白凝膠性能的影響。在乳清蛋白 等電點時(即pH 5.2),蛋白粒徑在1 680~1 780 nm波長 范圍內,顯著大于在其他pH值時所形成的蛋白聚集體粒 徑(約為370~470 nm),而越遠離等電點時蛋白聚集體 粒徑越小,并隨著L-His質量濃度的增加而進一步減小 聚集體粒徑。蛋白聚集體的比表面積與蛋白聚集體粒徑 有相反的變化規(guī)律;在pH 5.2時,其比表面積值達到最小 值;越遠離等電點,特別是在堿性pH值條件下蛋白聚集 體的比表面積增大50~70 倍。此外,蛋白分子在pH 2.0 時帶有少量的正電;在乳清蛋白等電點時,其中非乳球 蛋白可能因蛋白羧基、氨基去質子化而使蛋白帶少量的 負電荷;pH值的提高促使蛋白分子去質子增多而帶更多 的負電荷,而L-His進一步提高蛋白分子的帶負電荷。