桑葉:2018 年 11 月采摘于信陽農林學院,經信陽 農林學院中藥教研室梁麗香副教授鑒定為桑(Morus alba L.)的成熟葉片;葡萄糖標準品:合肥博美生物科 技有限責任公司;蒽酮:上海展云化工有限公司;大孔 樹脂:山東魯抗立科藥物化學有限公司;濃硫酸、鹽酸、 氫氧化鈉、乙醇(分析純):武漢市中天化工有限責任公 司;瓊脂粉(分析純):北京亞米生物科技有限公司;大 腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌:信陽農林學院微 生物實驗室;所有試驗用水均為二次重蒸水。UV-1600 型紫外-可見分光光度計:上海美普達 儀器有限公司;ME104 型電子分析天平:瑞士梅特勒 公司;HG101-3A 型電熱鼓風干燥箱:南京卓鼎干燥設 備廠;400Y 型多功能粉碎機:永康市鉑歐五金制品有 限公司;RE-52AA 型旋轉蒸發器:上海亞榮生化儀器廠;DKZ-2B 型電熱恒溫振蕩水槽:上海精宏實驗設備 有限公司;RWBC-08S 型微波萃取反應儀:南京蘇恩 瑞實驗儀器有限公司;JM-23D-40 型超聲波清洗器: 深圳市潔盟清洗設備有限公司;SPX-70BE 生化培養 箱、XFS-280A 型高壓滅菌鍋:上海力辰儀器科技有限 公司;層析柱[20 mm(15 mm)×200 mm]:江陰市新輝層 析設備有限公司。
上樣液 pH 值為 4.0 時 AB-8 型樹脂 對桑葉多糖的吸附率最高,為 90.06%,當上樣液 pH 值 低于 3.0 或高于 5.0 時,多糖在相對偏酸或偏堿的溶液 中溶解度較差,不利于樹脂的吸附,因此最佳上樣液 pH 值為 4.0。在解吸液 pH 值為 6.0 時 AB-8 型樹脂對 桑葉多糖的解吸率最高,為 78.11%;在 pH 值小于 6.0 時,解吸率隨酸性增加而降低;而在 pH 值大于 6.0 的 中性和弱堿性環境中,解吸率呈降低趨勢,所以最佳 解吸液 pH 值為 6.0。這可能因為桑葉中多糖類物質多 數顯弱酸性,在 pH 3.0~5.0 的溶液中呈穩定的分子 狀態被吸附,而在 pH 值為 6.0 的環境多呈游離態,不 利于吸附而被洗脫下來。上樣液濃度過高,雜質也會 與多糖分子同時競爭吸附,甚至會產生沉淀堵塞樹脂 孔道,阻礙大孔樹脂對多糖分子的吸附。所以,桑葉 多糖適宜的上樣液濃度為 3.0 mg/mL。