冷鏈與斷鏈流通對(duì)冰藏大黃魚(yú)品質(zhì)與微生物多樣
來(lái)源:未知
發(fā)布日期:2019-06-28 14:49【大 中 小】
大黃魚(yú)(Pseudosciaena crocea)又名石首魚(yú)、黃瓜魚(yú)、大鮮,為石首魚(yú)科黃魚(yú)屬暖溫性近海中下層 集群洄游魚(yú)類(lèi),廣泛分布于黃海、東海、臺(tái)灣海峽等地,是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi),為傳統(tǒng)“四大海產(chǎn)” 之一。大黃魚(yú)體內(nèi)蛋白質(zhì)、微量元素與維生素含量豐富,具有很好的食療效果,在東南亞有較好的消 費(fèi)市場(chǎng)。此外,大黃魚(yú)中還含有豐富的微量元素硒,能清除人體代謝產(chǎn)生的自由基,延緩衰老, 對(duì)各種癌癥的預(yù)防有良好效果。水產(chǎn)品由于其水分含量高、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富,極易發(fā)生腐敗變質(zhì)。低溫 保鮮是目前應(yīng)用最為廣泛的水產(chǎn)品保鮮方法。冰藏保鮮是低溫保鮮方法之一,是指在水產(chǎn)品周?chē)胖?冰,以此降低魚(yú)體溫度,使其接近冰點(diǎn)而不凍結(jié),從而維持魚(yú)體新鮮度的方法。
目前,我國(guó) 90%以上大黃魚(yú)的流通銷(xiāo)售多以冰鮮形式進(jìn)行,在實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)途運(yùn)輸時(shí),使原料保持相 對(duì)較高的新鮮度。冷鏈物流泛指冷藏冷凍類(lèi)食品在生產(chǎn)、加工、貯藏、運(yùn)輸和銷(xiāo)售等環(huán)節(jié)始終處于規(guī) 定的低溫環(huán)境下,以保障食品質(zhì)量的特殊供應(yīng)鏈系統(tǒng)。多數(shù)情況下,由于運(yùn)輸條件與成本的限制, 所以水產(chǎn)品在流通期間的溫度達(dá)不到規(guī)定要求,樣品易受外界環(huán)境的影響而發(fā)生溫度波動(dòng),從而影響 水產(chǎn)品品質(zhì)。 聚 合 酶 鏈 式 反 應(yīng) - 變 性 梯 度 凝 膠 電 泳 (Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis, PCR-DGGE)技術(shù)是目前用于分析微生物群落多樣性與監(jiān)視種群動(dòng)態(tài)的分子指紋技術(shù)手 段。相較于傳統(tǒng)微生物學(xué)方法,該技術(shù)不通過(guò)培養(yǎng),直接從樣品中提取細(xì)菌總 DNA,能檢測(cè)到難以 培養(yǎng)或不能培養(yǎng)的微生物,且能同時(shí)對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行分析,具有快速、高效等優(yōu)點(diǎn)。本研究主要 模擬大黃魚(yú)的冷鏈與斷鏈兩種流通方式,以感官評(píng)分、菌落總數(shù)與嗜冷菌數(shù)、TVB-N 值等指標(biāo)來(lái)綜 合評(píng)價(jià)流通期間的溫度變化對(duì)大黃魚(yú)品質(zhì)的影響,并通過(guò) PCR-DGGE 技術(shù)分析兩種流通過(guò)程中冰藏 大黃魚(yú)的菌相變化,探究大黃魚(yú)流通過(guò)程中的腐敗菌,以期為大黃魚(yú)的流通運(yùn)輸與保鮮加工提供理論參考。
1 材料與方法
1.1 原料
冰鮮大黃魚(yú) 2016 年 1 月購(gòu)自上海蘆潮港海鮮市場(chǎng),樣品體態(tài)勻稱(chēng),鱗片完整且緊貼,魚(yú)鰓鮮紅 清晰、眼球飽滿,具固有清新氣味,質(zhì)量(500 ± 50)g,30min 內(nèi)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室,層冰層魚(yú)裝入泡沫箱 內(nèi)。
1.2 主要藥品試劑
平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基、胰蛋白胨、氯化鈉,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;細(xì)菌基因組提取試劑 盒。溶菌酶,天根生化科技(北京)有限公司;Premix Ex Taq 酶、100bp DNA Ladder Marker,大連寶生物工程公司;丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺、尿素、TEMED,美國(guó) Sunshine 公司;所有引物均由上海 生工生物工程公司合成。
1.3 主要儀器設(shè)備 FOSS Kjeltec8400 凱式定氮儀,丹麥 FOSS 中國(guó)上海有限公司;Testo-176T4 型德圖電子溫度記錄 儀,德國(guó)儀器國(guó)際貿(mào)易(上海)有限公司;Appendrof PCR 儀,德國(guó) Eppendorf 公司;Dcode system 變性 凝膠梯度電泳儀、Gel-Doc2000 型凝膠成像儀,美國(guó) Bio-Rad 公司 Centrifuge 5810R 冷凍離心機(jī),德 國(guó) Eppendorf 公司;BCD-256KF 冰箱,青島海爾股份有限公司;生化培養(yǎng)箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);MLS-3750 滅菌鍋,日本 SANYO 公司;等。
1.4 原料處理
將大黃魚(yú)樣品分成兩組,其中冷鏈組(T1):從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至結(jié)束,樣品始終處于 4℃;斷鏈組 (T2):模擬流通過(guò)程,樣品在搬運(yùn)、運(yùn)輸、配送和銷(xiāo)售環(huán)節(jié)于 20℃分別放置 2,24,8,1h,其余環(huán) 節(jié)溫度均為 4℃。模擬冷鏈與斷鏈物流試驗(yàn)中溫度要求及相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)參照《食品冷鏈物流技術(shù)與管 理規(guī)范》進(jìn)行。冷
1.5 試驗(yàn)方法
溫度監(jiān)測(cè) 將多點(diǎn)溫度采集儀溫度探頭分別置于魚(yú)肉、泡沫箱內(nèi)冰層與箱蓋間和冷藏箱內(nèi),分別監(jiān)測(cè)魚(yú)體中 心、泡沫箱內(nèi)和泡沫箱外環(huán)境溫度。每隔 15min 采集 1 次數(shù)據(jù),對(duì)大黃魚(yú)流通期間的溫度波動(dòng)進(jìn)行實(shí) 時(shí)監(jiān)測(cè)。假單胞菌為革蘭氏陰性桿菌,單鞭毛,具運(yùn)動(dòng)性,是水產(chǎn)品中一類(lèi)常見(jiàn)的需氧型腐敗菌。許 鐘等研究表明,假單胞菌是冷藏養(yǎng)殖羅非魚(yú)在 0,5℃和 10℃貯藏貨架期終點(diǎn)的特定腐敗菌;朱天 祥等報(bào)道其為冰鮮大黃魚(yú) 4℃冷藏 5d 后的優(yōu)勢(shì)腐敗菌。希瓦氏菌為革蘭氏陰性桿菌,郭紅等研 究發(fā)現(xiàn),南美白對(duì)蝦達(dá)一級(jí)鮮度時(shí),在冰溫(-1.4±0.1)℃條件下的特定腐敗菌為希瓦氏菌。不動(dòng)桿菌存 在于魚(yú)體表面的黏液、魚(yú)鰓及消化道中,也為常見(jiàn)的腐敗細(xì)菌。
結(jié)論
本文研究了冰鮮大黃魚(yú)在冷鏈與斷鏈流通中品質(zhì)及微生物演替規(guī)律。得出結(jié)果:隨著流通時(shí)間的 延長(zhǎng),大黃魚(yú)感官分值呈上升趨勢(shì),品質(zhì)相應(yīng)劣變,微生物數(shù)明顯升高,且斷鏈組增長(zhǎng)速率大于冷鏈組。斷鏈組樣品在流通至 275h 時(shí),感官分值和菌落總數(shù)分別達(dá)到 (2.35±0.13)lg (CFU/g)和 (6.50±0.07)lg (CFU/g),超出可接受范圍。冷鏈組貨架期為 275~347h,而斷鏈組貨架期僅為 203~ 275h。通過(guò)直接提取不同流通階段樣品中的細(xì)菌 DNA,PCR 擴(kuò)增后進(jìn)行 DGGE 電泳分析,并對(duì) DGGE 圖譜上分離較好且較亮條帶的切膠回收并測(cè)序,可獲得冰鮮大黃魚(yú)在兩種流通期間微生物的種 類(lèi)變化及優(yōu)勢(shì)菌。結(jié)果表明:冰鮮大黃魚(yú)在流通期間貯藏末期的主要優(yōu)勢(shì)菌為假單胞菌與嗜冷桿菌, 也有不動(dòng)桿菌與希瓦氏菌。
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